微生物實(shí)驗前端我們用微生物限度檢查儀提取樣品，后面我們需要把提取樣品的濾膜貼到事前準備好的培養基上，菌面朝上，平貼，不得有氣泡。相應的液體培養基注入濾杯內，培養基掩蓋濾膜表面即可。培養基直接關(guān)系到微生物的實(shí)驗結果是否成功。在培養基當中我們的ph值又是重要的影響因素。微生物對生長(cháng)對于ph環(huán)境要求很高。合適的ph環(huán)境下微生物才能正常生長(cháng)。在實(shí)驗前我們一般都會(huì )對培養基進(jìn)行滅菌處理，滅菌會(huì )對培養基的PH值產(chǎn)生重大的變化。今天我們來(lái)分析下引起PH值變化有哪些因素。

　　1、滅菌的時(shí)間和溫度

　　在高壓濕熱滅菌時(shí)，長(cháng)時(shí)間的高溫會(huì )對培養基產(chǎn)生很多不利的影響，例如會(huì )導致?tīng)I養物質(zhì)分解、營(yíng)養成分改變以及pH值變化，進(jìn)而影響微生物生長(cháng)。同時(shí)還可能引起培養基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝膠強度變化等。培養基在滅菌過(guò)程中，滅菌的溫度和時(shí)間，高壓滅菌器升溫、降溫的速率，滅菌容器的容積和裝載方式等因素都對培養基的滅菌有著(zhù)重要影響。

　　2、培養基的成分

　　在培養基的配制過(guò)程中我們會(huì )發(fā)現，同樣的滅菌溫度和時(shí)間，同樣的體積和裝量的不同培養基，在滅菌后pH值變化不同，有的培養基pH值變化較多，有的培養基pH值變化較少。這是因為不同培養基的成分不盡相同，而不同的成分在滅菌過(guò)程中對培養基ph值有著(zhù)不同的影響。糖類(lèi)和蛋白胨是培養基中最常見(jiàn)的兩種重要成分，那么這兩種成分分別對培養基滅菌后pH值有著(zhù)什么樣的影響呢?

　　糖類(lèi)，例如葡萄糖、乳糖等作為碳源被微生物所利用。糖類(lèi)在高溫條件下會(huì )產(chǎn)生有機酸使培養基pH值下降。一般情況下，培養基含糖量越高，滅菌后pH值下降越多。如果過(guò)度滅菌pH值變化會(huì )更加明顯。同時(shí)，糖類(lèi)在高溫滅菌時(shí)容易焦化，使培養基顏色加深。

　　蛋白胨一般作為培養基氮源，為微生物的生長(cháng)提供營(yíng)養物質(zhì)。蛋白胨在培養基滅菌時(shí)還能對培養基的pH值變化起到一定的緩沖作用。一般含胨量高的培養基，滅菌前后pH值變化相對較小。

　　另外，若培養基成分中含有緩沖劑，如磷酸氫二鉀等，也可以減少培養基滅菌前后pH值的變化。

　　3、測量pH值時(shí)的溫度

　　同一培養基在不同溫度下測得的pH值也會(huì )有一定差異，一般培養基的pH值會(huì )隨著(zhù)測量時(shí)溫度的升高而降低。培養基滅菌之后未完全冷卻時(shí)，測量的pH值一般會(huì )偏低，這是由于溫度升高時(shí)溶液中的游離離子數增多，測得的pH值較低;反之，當溫度降低時(shí)游離離子數減少，測得的pH值較高。通常我們在測定培養基pH值時(shí)，溫度控制在25℃左右。

　　以上就是微生物中培養基PH值引起變化的重要原因，知道這些因素我們在合理的操作控制PH值能更好的的到微生物實(shí)驗想要的結果!