薄膜過(guò)濾法在內鏡清洗消毒效果監測中是一種重要且有效的微生物檢測手段,其應用過(guò)程及要點(diǎn)如下:
一、原理
薄膜過(guò)濾法是利用微孔濾膜攔截水樣中的微生物,將微生物截留在濾膜上,再將濾膜置于適宜的培養基上培養,通過(guò)計數生長(cháng)的菌落數來(lái)評估水樣中微生物的含量,進(jìn)而判斷內鏡清洗消毒的效果。如果清洗消毒徹底,水樣中的微生物數量應極少或沒(méi)有;若微生物數量超標,則說(shuō)明清洗消毒可能存在問(wèn)題。
二、應用步驟
采樣準備
準備好無(wú)菌的采樣瓶、微孔濾膜(一般孔徑為 0.45μm)、過(guò)濾裝置、無(wú)菌鑷子、培養基等。
確保所有器具都經(jīng)過(guò)嚴格滅菌處理,以避免外界微生物污染影響檢測結果。
采樣
在內鏡清洗消毒后,使用無(wú)菌采樣瓶從內鏡的各腔道或沖洗用水中采集一定量的水樣。例如,對于胃鏡,可從其活檢通道、吸引通道等分別采集水樣,以保證全面評估內鏡的清洗消毒效果。
采樣量應根據相關(guān)標準和實(shí)際情況確定,一般不少于 100mL。
過(guò)濾
將微孔濾膜安裝在內鏡微生物檢測儀過(guò)濾裝置上,確保濾膜與過(guò)濾裝置之間密封良好,防止水樣泄漏。
將采集的水樣緩慢倒入過(guò)濾裝置中,開(kāi)啟真空泵或利用其他壓力源,使水樣通過(guò)濾膜,微生物則被截留在濾膜上。
過(guò)濾完成后,用少量無(wú)菌水沖洗過(guò)濾裝置,以去除濾膜上可能殘留的非微生物物質(zhì),但要注意沖洗水量不宜過(guò)多,以免沖走濾膜上的微生物。
培養
用無(wú)菌鑷子小心地將濾膜從過(guò)濾裝置上取下,平放在預先準備好的適宜培養基上。培養基的選擇應根據可能存在的微生物種類(lèi)來(lái)確定,例如,對于一般細菌檢測,可使用營(yíng)養瓊脂培養基;若要檢測特定致病菌,如結核分枝桿菌,則需使用相應的選擇性培養基。
將含有濾膜的培養基置于適宜的溫度和環(huán)境下培養,一般細菌培養溫度為 35 - 37℃,培養時(shí)間為 24 - 48 小時(shí);某些特殊微生物可能需要更長(cháng)時(shí)間的培養。
計數與結果判定
培養結束后,觀(guān)察培養基上生長(cháng)的菌落數。使用計數器或肉眼直接計數濾膜上的菌落,記錄每個(gè)濾膜上的菌落數量。
根據相關(guān)標準和規定,判定內鏡清洗消毒效果是否合格。例如,若規定每 100mL 水樣中細菌總數不得超過(guò)一定數值(如 20CFU),當檢測結果超過(guò)該數值時(shí),則判定內鏡清洗消毒不合格,需要重新進(jìn)行清洗消毒處理,并查找原因,采取改進(jìn)措施。
三、優(yōu)點(diǎn)
靈敏度高:能夠檢測出水樣中含量極低的微生物,對于評估內鏡清洗消毒效果具有較高的準確性。即使內鏡清洗消毒后殘留的微生物數量很少,也可能通過(guò)薄膜過(guò)濾法被檢測出來(lái)。
操作相對簡(jiǎn)便:與其他一些復雜的微生物檢測方法相比,薄膜過(guò)濾法的操作步驟相對較為簡(jiǎn)單,易于在醫療機構等場(chǎng)所開(kāi)展。
可同時(shí)檢測多種微生物:通過(guò)選擇合適的培養基,可以在一次檢測中同時(shí)檢測出多種不同類(lèi)型的微生物,全面評估內鏡清洗消毒后的微生物污染情況。
四、注意事項
無(wú)菌操作:在整個(gè)采樣、過(guò)濾、培養等過(guò)程中,必須嚴格遵守無(wú)菌操作原則,防止外界微生物污染水樣和濾膜,影響檢測結果的準確性。
濾膜質(zhì)量:選擇質(zhì)量合格的微孔濾膜,確保其孔徑均勻、無(wú)破損,以保證過(guò)濾效果和微生物的截留率。
培養條件控制:嚴格按照不同微生物的生長(cháng)要求控制培養溫度、濕度、氣體環(huán)境等條件,確保微生物能夠正常生長(cháng)繁殖,以便準確計數。
重復檢測:為了減少檢測誤差,提高結果的可靠性,建議對同一水樣進(jìn)行多次重復檢測,取平均值作為最終結果。